1.干热灭菌柜应安放在室内干燥和水平处，防止振动和腐蚀。
2.要注意安全用电，根据耗电功率安装足够容量的电源闸刀。选用足够的电源导线，并应有良好的接地线。
3.带有电接点水银温度计式温控器的干热灭菌柜应将电接点温度计的两根导线分别接至箱顶的两个接线柱上。另将一支普通水银温度计插入排气阀中，打开排气阀的孔。调节电接点水银温度计至所需温度后紧固钢帽上的螺丝，以达到恒温的目的。但注意调节时切勿将指示铁旋至刻度尺外。
4.当一切准备工作就绪后方可将试品放入干热灭菌柜内，然后连接并开启电源，红色指示灯亮表示箱内已加热。当温度达到所控温度时，红灯熄灭绿灯亮，开始恒温。为了防止温控失灵，还照看。
5.放入试品时应注意排列不能太密。散热板上不应放试品，以免影响热气流向上流动。禁止烘焙易燃、易爆、易挥发及有腐蚀性的物品。
6.当需要观察工作室内样品情况时，可开启外道箱门，透过玻璃门观察。但箱门以尽量少开为好，以免影响恒温。特别是当工作在200℃以上时，开启箱门有可能使玻璃门骤冷而破裂。
7.有鼓风的干热灭菌柜，在加热和恒温的过程中将鼓风机开启，否则影响工作室温度的均匀性和损坏加热元件。
8.工作完毕后应及时切断电源，确保安全。
9.干热灭菌柜内外要保持干净。